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非洲猪瘟(African Swine Fever、ASF)是由非洲猪瘟病毒
2017-10-15

  非洲猪瘟(African Swine Fever、ASF)是由非洲猪瘟病毒(African Swine Fever Virus、ASFV) 引起猪的一种急性、热性、高度接触传染性疾病,病死率几乎高达 100%, ASF 最近在我国爆发,给我国养猪业造成重大损失,因此 ASFV 的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着重要作用,幸运赛车为此本公司开发了简单快捷的非洲猪瘟病毒荧光定量PCR试剂盒。

  非洲猪瘟(African Swine Fever、ASF)是由非洲猪瘟病毒(African Swine Fever Virus、ASFV) 引起猪的一种急性、热性、高度接触传染性疾病,病死率几乎高达 100%, ASF 最近在我国爆发,给我国养猪业造成重大损失,因此 ASFV 的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着重要作用,为此本公司开发了简单快捷的 ASFV 染料法荧光定量 PCR 检测试剂盒,它具有下列特点:

  2. 根据 ASFV 的保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。

  低温运输、-20℃保存(A 袋试剂放样品准备区、B 袋的阳性对照分开放置),有效期 一年。

  1.用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装(一管式病毒 DNAout 的成分)。

  (以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高, 因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成 分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照, 只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。

  9. 在 PCR 管中加入下列成分(待测样品需要做三次重复,下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子 储存好后最后加):

  10. 盖上盖子后上机,按下面参数进行 PCR(具体PCR参数可以根据仪器不同而自行优化)。

  具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合 DNA 时, 最大吸收光谱在 471 nm,结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500 nm,最大发射光 谱在 530 nm。信号采集可以设置在复性或延伸步骤。

  12. 以阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA 浓度的 log 值,再推算出其浓度。